La Urea UV Cinética AA Líquida Wiener es un reactivo utilizado en laboratorios clínicos para la determinación cuantitativa de la urea en suero, plasma u orina. Se basa en un método enzimático y cinético que mide la velocidad de cambio de absorbancia a una longitud de onda específica (UV), directamente proporcional a la concentración de urea en la muestra.
Paso a Paso del Principio:
- Hidrólisis de la Urea: La urea, presente en la muestra, es hidrolizada por la enzima ureasa en amonio (NH4+) y dióxido de carbono (CO2). Ejemplo: Urea (en la muestra) + H2O --Ureasa--> 2NH4+ + CO2
- Reacción con α-cetoglutarato y NADH: El amonio reacciona con α-cetoglutarato y NADH (nicotinamida adenina dinucleótido reducido) en presencia de la enzima glutamato deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. Ejemplo: NH4+ + α-cetoglutarato + NADH --GLDH--> Glutamato + NAD+ + H2O
- Medición de la Disminución de NADH: La clave del método cinético radica en que el NADH absorbe luz a 340 nm. A medida que se convierte en NAD+, la absorbancia a esta longitud de onda disminuye. Esta disminución es medida espectrofotométricamente. Ejemplo: Se mide la velocidad a la que la absorbancia a 340 nm disminuye; cuanto más rápido disminuye, mayor es la concentración de urea en la muestra original.
- Cálculo de la Concentración de Urea: La velocidad de la reacción (la disminución de la absorbancia) es directamente proporcional a la concentración inicial de urea. Esta relación se establece mediante calibradores de concentración conocida. Ejemplo: Se utiliza una curva de calibración (obtenida con estándares de urea) para relacionar la velocidad de reacción con la concentración de urea.
Importancia Práctica: La determinación de la urea es crucial para evaluar la función renal. Elevados niveles de urea en sangre (azotemia) pueden indicar insuficiencia renal. La monitorización de los niveles de urea también es importante en pacientes en diálisis para evaluar la efectividad del tratamiento.
