La cromatografía en papel es una técnica sencilla para separar diferentes sustancias de una mezcla.
Aquí te explicamos cómo funciona, paso a paso.
Preparación de los Materiales
Primero, necesitas los materiales adecuados. Necesitarás una tira de papel de filtro especial para cromatografía. También requerirás un vaso de precipitado o recipiente similar, un lápiz, una regla, la muestra que quieres separar, y un solvente (un líquido como agua, alcohol o una mezcla de ambos). Asegúrate de tener a mano un capilar o una pajita fina para aplicar la muestra.
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Preparación del Papel
Corta una tira de papel de filtro de tamaño adecuado para que quepa dentro del vaso. Debe ser lo suficientemente alta como para que no toque el fondo del vaso, pero que casi llegue. Con un lápiz y una regla, dibuja una línea horizontal a unos 1-2 cm del borde inferior del papel. Esta línea se llama la línea de base.
Aplicación de la Muestra
Ahora, aplica una pequeña cantidad de la muestra sobre la línea de base. Usa el capilar o la pajita fina para tomar una pequeña gota de la muestra. Aplica la gota en el centro de la línea. Deja que la gota se seque completamente. Repite este proceso varias veces, aplicando pequeñas gotas en el mismo lugar, permitiendo que cada una se seque antes de aplicar la siguiente. Esto concentra la muestra en un punto pequeño. Es importante usar un lápiz, no un bolígrafo, porque la tinta del bolígrafo también se separaría durante el proceso.
Preparación del Solvente
Vierte una pequeña cantidad del solvente en el vaso de precipitado. El nivel del solvente debe ser inferior a la línea de base que dibujaste en el papel. El objetivo es que el solvente no toque directamente la muestra que aplicaste al papel. Cierra el vaso con una tapa o papel film. Esto ayuda a saturar la atmósfera del vaso con el vapor del solvente, lo cual mejora la separación.
Desarrollo de la Cromatografía
Coloca cuidadosamente la tira de papel dentro del vaso. Asegúrate de que el extremo inferior del papel esté sumergido en el solvente, pero que la línea de base con la muestra quede por encima del nivel del líquido. El solvente comenzará a ascender por el papel por capilaridad.
Observa cómo el solvente se mueve hacia arriba a través del papel. A medida que el solvente sube, arrastra consigo los diferentes componentes de la muestra. Los componentes que son más solubles en el solvente se moverán más rápido y más lejos. Los componentes menos solubles se moverán más lentamente. Continúa el proceso hasta que el solvente haya ascendido casi hasta la parte superior del papel. Pero detén el proceso antes de que el solvente llegue al borde superior.
Secado y Visualización
Retira con cuidado la tira de papel del vaso. Marca con un lápiz el punto hasta donde llegó el solvente. Esta línea se llama el frente del solvente. Deja que el papel se seque completamente. Una vez que el papel esté seco, puedes ver las diferentes manchas o bandas que representan los componentes separados de tu muestra.
Si los componentes separados son incoloros, puedes usar diferentes técnicas para visualizarlos. Por ejemplo, puedes exponer el papel a la luz ultravioleta (UV). Algunos compuestos fluorescentes bajo la luz UV y se verán como manchas brillantes. También existen reactivos químicos que puedes rociar sobre el papel para revelar las manchas.
Análisis de los Resultados
Una vez que hayas visualizado las manchas, puedes analizarlas. Mide la distancia que recorrió cada mancha desde la línea de base. También mide la distancia que recorrió el solvente desde la línea de base hasta el frente del solvente. Calcula el factor de retención (Rf) para cada mancha. El Rf se calcula dividiendo la distancia recorrida por la mancha entre la distancia recorrida por el solvente. El valor de Rf es una característica física de cada compuesto.
Compara los valores de Rf con los valores de Rf conocidos para identificar los componentes de tu muestra. La cromatografía en papel es una técnica valiosa para la separación e identificación de sustancias.
