El agar chocolate es un medio de cultivo enriquecido.
Se utiliza para el crecimiento de bacterias exigentes.
Vamos a explicar cómo se prepara.
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Ingredientes y Materiales
Primero, necesitas los ingredientes y materiales adecuados.
Necesitarás agar base como agar nutritivo o agar de soja tripticasa.
También necesitarás sangre de oveja desfibrinada al 5-10%.
Finalmente, agua destilada y un autoclave son esenciales.
Se requieren matraces, placas de Petri estériles y un baño de agua.
Preparación del Agar Base
Primero, prepara el agar base según las instrucciones del fabricante.
Pesa la cantidad adecuada de polvo de agar.
Disuélvela en agua destilada.
Calienta la mezcla con agitación constante.
Asegúrate de que el agar se disuelva completamente.
Evita que se queme.
Luego, esteriliza el agar base en autoclave.
Normalmente, se esteriliza a 121°C durante 15 minutos.
Esto asegura la eliminación de microorganismos contaminantes.
Enfriamiento del Agar Base
Después de la esterilización, deja que el agar base se enfríe.
La temperatura debe estar entre 45-50°C.
Utiliza un baño de agua para mantener la temperatura.
Es crucial evitar que el agar se solidifique.
Adición de Sangre
Ahora, añade la sangre de oveja desfibrinada al agar base enfriado.
La sangre debe estar a temperatura ambiente.
Añade el 5-10% del volumen total de agar.
Mezcla suavemente pero a fondo.
Evita la formación de burbujas.
La sangre debe distribuirse uniformemente.Calentamiento para "Chocolatear"
Calienta la mezcla de agar y sangre suavemente.
Mantén la temperatura a 80°C durante unos 10 minutos.
Agita constantemente.
Este proceso lisa los glóbulos rojos.
Libera factores de crecimiento esenciales.
Esto da al agar su color marrón característico.
Es el proceso de "chocolatear".
Vertido en Placas
Vierte el agar chocolate en placas de Petri estériles.
Hazlo en un ambiente estéril.
Llena las placas hasta aproximadamente 4 mm de espesor.
Deja que el agar se solidifique completamente.
Esto puede tomar unos 30 minutos.
Inspecciona las placas en busca de burbujas o contaminación.
Almacenamiento
Una vez solidificado, almacena las placas de agar chocolate invertidas.
Guárdalas en el refrigerador a 2-8°C.
Esto previene la condensación.
Las placas pueden almacenarse durante varias semanas.
Es importante verificar si hay signos de contaminación antes de usar.
Control de Calidad
Realiza un control de calidad en cada lote de agar chocolate.
Inocula las placas con microorganismos de control de calidad.
Por ejemplo, Haemophilus influenzae o Neisseria gonorrhoeae.
Verifica el crecimiento adecuado.
Asegúrate de que el agar esté libre de contaminación.
Aplicaciones
El agar chocolate se utiliza para cultivar bacterias exigentes.
Esto incluye Haemophilus y Neisseria.
Se usa comúnmente en laboratorios de microbiología clínica.
Ayuda a diagnosticar infecciones.
Contribuye a la identificación de patógenos.
